高效液相色譜柱是什么呢?高效液相色譜柱是高效液相色譜的心臟,在高效液相色譜儀的使用中保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性、延長柱子的使用壽命非常重要。今天小編就來具體介紹一下高效液相色譜柱的使用及管理,希望可以幫助到大家。
液相色譜法是指流動相為液相的色譜技術,在經典的液相色譜法基礎上,引入氣相色譜法理論,在技術上采用高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測器,實現了分析速度快、分析效率高和操作自動化,它具有高壓、高速、高效、高靈敏度等特點。
色譜柱使用時間后就會出現柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化,如不采取措施,將會縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經濟損失。因此,有必要加強和規范色譜柱的管理,從而延長色譜柱的使用壽命。
常用的色譜柱填充劑有硅膠和化學鍵合硅膠、離子交換樹脂、凝膠或玻璃微球等填充劑。在化學鍵合硅膠中以十六烷基硅烷鍵合硅膠最常用,辛基硅烷鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用。近年來,由于蛋白質等生物大分子物質分離提純技術的飛速發展,離子交換色譜柱、凝膠色譜柱的應用也越來越廣。
色譜柱的管理
制定色譜柱管理的標準操作規程并嚴格執行。每一根新購進的色譜柱必須造冊登記,內容包括:生產公司、品名、型號、規格、購進時間、啟用時間、單價、柱內保護溶液等。色譜柱分類存放,硅膠柱、化學鍵合硅膠柱、氰基或氨基柱、離子交換樹脂柱、凝膠柱各用一個色譜柱盒,盒上貼上標簽,注明類別。
隨柱說明書裝入密實袋附在登記本上。每啟用一根色譜柱,在色譜柱上貼上標簽,注明啟用日期。每根柱子每兩個月保養一次,特別是對于一些使用頻率少的柱子,因為放置時間長,容易干柱,每一次做好保養記錄。
對于確已失效的柱子,做好停用記錄,不能隨意丟棄,專門存放,如果現用的柱子的填料需要填補,可以用存放的柱子的填料。在從事生產的單位的質檢部門,對于使用時間較長柱效降低的柱子,可把它用于檢測產品的中間體。
色譜柱的保養
色譜柱使用一段時間后,常遇到柱子被污染,柱效會有一定程度的下降,采用適當的方法對色譜柱進行保護,可以延長色譜柱的使用壽命。樣品和流動相的處理:溶解的樣品進樣前用濾膜過濾,以除去不溶物。
如果必要,需進行樣品的預處理。流動相中如有不純物質將影響柱效,所以溶劑盡量使用色譜級別的,至少是分析純級別,流動相使用前用微孔薄膜過濾。在流動相的輸液管前安裝過濾器。過濾器定期用甲醇超聲清洗,如果效果不好,可用10%的稀硝酸浸泡清洗。對于堵塞嚴重的過濾器,可在火焰上灼燒后再清洗。